WWW.PDF.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Разные материалы
 

«Методическое пособие по теме Цитогенетический анализ кариотипа человека для студентов второго курса лечебного и педиатрического факультетов по ...»

МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ ПО ТЕМЕ "ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЙ

АНАЛИЗ КАРИОТИПА ЧЕЛОВЕКА" ДЛЯ СТУДЕНТОВ ВТОРОГО

КУРСА ЛЕЧЕБНОГО И ПЕДИАТРИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТОВ ПО

ДИСЦИПЛИНЕ "ГЕНЕТИКА ЧЕЛОВЕКА".

КАЙГОРОДЦЕВ М.А., АССИСТЕНТ КАФЕДРЫ «БИОЛОГИЯ» ЕНОКТАЕВА О.В.

ГБОУ ВПО ТЮМГМУ

ТЮМЕНЬ, РОССИЯ

METHODICAL TUTURIAL «CYTOGENETIC ANALYSIS OF HUMAN KARYOTYPE» FOR SECOND-YEAR STUDENTS MEDICAL AND PEDIATRIC FACULTY BY DISCIPLINE «HUMAN GENETICS».

KAYGORODTSEV M.A., ENOKTAEVA O.V., ASSISTANT OF BIOLOGY DEPARTMENT

SBEI HPE TYUMSMU

TYUMEN, RUSSIA

Методическое пособие по теме "Цитогенетический анализ кариотипа человека" для студентов второго курса лечебного и педиатрического факультетов по дисциплине "Генетика человека".

Форма организации учебного процесса: практическое занятие Цель занятия: Ознакомить с классификацией хромосомных аберраций.

Изучить клиническую характеристику хромосомных патологий. Ознакомится с принципами учета хромосомных аберраций у пациентов.

Ход занятия:



Работа №1. Изучение классификации хромосомных аберраций.

Задание: Записать определения к себе в тетрадь.

Хромосомные аберрации – это структурные и числовые аномалии хромосом, регистрируемые в метафазе клеточного деления.

Классификация хромосомных аберраций

1) По времени возникновения в процессе клеточного деления:

- Аберрации хромосомного типа. Возникают при повреждении хромосомы на предсинтетической стадии (G1-фаза), когда хромосома реагирует как однонитчатая структура.

- Аберрации хроматидного типа. Возникает при повреждении хромосомы на стадии двух нитей (S- и G2- фазы).

2) По причине возникновения:

- Спонтанные. Причина возникновения мутаций неизвестна.

- Индуцированные. Возникают под действием мутагенных факторов.

3) По типу клеток, в которых они располагаются:

- В гаметах. Хромосомные аберрации передаются следующим поколениям.

- В соматических клетках.

4) По изменению числа или структуры хромосом:

- Геномные мутации – изменение числа хромосом

- Хромосомные мутации – изменение структуры хромосом

5) По способности передаваться в ряду клеточных поколений:

- Стабильные аберрации – хромосомы с одной центромерой, способные дуплицироваться и прикрепляться к веретену деления. Осложнения в клеточном делении отсутствуют, так как данные аберрации могут передаваться в ряду клеточных поколений. Обе дочерние клетки содержат данный тип аберрации.

- Нестабильные аберрации – хромосомные аберрации, которые не передаются в ряду клеточных поколений. В первом случае хромосомы не способны прикрепляться к веретену деления, так как в своей структуре не содержат центромеры. Такие хромосомы называются ацентрическими. В процессе деления клетки могут оставаться только в одной дочерней клетке или быть утеряны.

Во втором случае хромосомы препятствуют делению клетки, так как являются полицентрическими. Веретено деления, прикрепившееся к данной хромосоме с разных полюсов клетки, препятствует цитокенезу.





Работа №2. Изучение морфоструктуры хромосомных аберраций.

Задание: Используя учебник, распределите нижеуказанные типы хромосомных аберраций на стабильные и нестабильные.

Стабильные Нестабильные Типы хромосомных аберраций хромосомные хромосомные аберрации аберрации Дицентрические хромосомы Ацентрические кольца Центрические кольца Хромосома с инсерцией Полицентрические хромосомы Центрический фрагмент Ацентрический фрагмент Хромосома с дупликацией Парацентрические инверсии Перицентрические инверсии Изохромососма Реципрокные транслокации Нереципрокные транслокации Робертсоновские транслокации Анафазные мосты Работа №3. Геномные мутации.

Задание: Заполнить таблицу, вписав в нее нижеуказанные синдромы. Какой синдром нельзя включить в данную таблицу и почему?

Синдромы: триплоидия, синдром Шерешевского-Тернера, синдром Джейкоба, синдром Варкани, Синдром Патау, синдром Эдвардса, синдром Дауна, синдром кошачьего крика, синдромы Клайнфельтера, синдром трипло-Х.

–  –  –

Работа №4. Принципы учета хромосомных аберраций.

Задание: Рассмотреть под микроскопом метафазные пластинки человека.

Ознакомится с принципами учета хромосомных аберраций у пациентов при анализе цитологических препаратов. Ответить на вопрос: Какие клетки используют для цитогенетического анализа?

Рис. 1: Протокол цитогенетического исследования.

Правила анализа цитологического препарата:

1) Учитываются метафазные пластинки, на которых хромосомы хорошо прокрашены и равномерно разбросаны.

2) Недопустимо наличие случайных хромосом в поле зрения.

3) Учитываются пределы уровня конденсации хромосом.

4) Хромосомы не налегают друг на друга.

Данные цитогенетических исследований заносят в специальные бланкипротоколы (Рис. 1). Каждый из прямоугольников на бланке соответствует одной проанализированной клетке. В них отмечается число хромосом и координаты пластинки. Если имеется аберрация, то ее схематически зарисовывают.

Клетки без аберраций обозначаются символом «N».

При завершении анализа препарата в бланк заносят основные показатели:

общее число проанализированных клеток, число клеток с аберрациями хромосом, общее число аберраций, общее число поврежденных хромосом, типы аберраций.

Работа №5. Цитогенетические методы изучения хромосом.

Задание: Прочитать и записать основную суть представленных методов изучения хромосом.

Цитогенетические методы исследования хромосом связаны, прежде всего, с микроскопическими методами изучения хромосом. При этом исследуемым материалом могут послужить клетки костного мозга, лимфоциты, фибробласты, клетки кожи, регенерирующей печени.

В настоящий момент для упрощения исследований, используют специальные обработки культур исследуемых клеток. Так, например, обработка клеток алкалоидом колхицином, ведет к накоплению делящихся клеток на стадии метафазы, а обработка клеток слабыми растворами определенных солей вызывает набухание и расправление хромосом.

Рис. 2: Чередование бэндов в хромосоме Х, полученное разными методами дифференциальной окраски.

Метод дифференциальной окраски позволяет идентифицировать каждую хромосому. Существует множество методов окраски (Q-окраска, С-окраска и другие). Наиболее распространённым методом окраски в клинических лабораториях является окраска методом Гимзы (G-окраска). G-окраска выявляется благодаря предварительной обработке хромосомных препаратов слабым раствором трипсина и последующей окраске красителем Гимза. При этом наблюдается полосатая исчерченность хромосом, где темные полосы соответствуют гетерохроматиновым районам, а светлые - эухроматиновым.

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) используют как для определения инфекционных и вирусных заболеваний, так и для поиска хромосомных аномалий. С помощью специального фермента ДНК-полимеразы в искусственных условиях увеличивают в объеме имеющийся ДНК материал. После этого исследуемый ген секвенируют для определения мутаций.

Секвенирование – техника определения нуклеотидной последовательности ДНК и РНК для получения формального описания её первичной структуры.

Современные методы секвенирования: 454 Life Sciences, Illumina-SOLEXA, IonTorrent, SOLiD, Helicos.

Общий план процедуры секвенирования делится на 3 этапа:

1) Создание библиотеки случайных последовательностей ДНК, которые можно будет сшить с общедоступными адаптерными последовательностями.

2) Увеличение числа копий генов с помощью ПЦР, которые будут использованы как образцы.

3) Определение первичной структуры всех фрагментов.

С развитием данного метода, стали доступны геномы разных по сложности живых систем: от микроорганизмов до человека. Секвенирование определенных регионов в геномах используется для выявления полиморфизмов и мутаций в генах.

Рекомендованная литература для подготовки к занятию:

1. Бочков, Н. П. Клиническая генетика: учебник с приложением на компакт диске / Н. П. Бочков. - 4-е изд., испр. и доп. – М: ГЭОТАР- Медиа, 2013. с. (2014) 2015

2. Мутовин, Г. Р. Клиническая генетика. Генодинамика и протеомика наследственной патологии: учебное пособие / Г. Р. Мутовин. - 3-е изд., испр. и доп. - Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 832 с.

Контроль теоретических знаний студентов:

I вариант:

1 вопрос: Назовите типы анеуплоидии с данными кариотипами:

а) 47, XXY б) 2n – 1 2 вопрос: Назовите синдромы с данными кариотипами:

а) 47, +13 б) 47, ХХ+21/ 46 ХХ 3 вопрос: Выберите из нижеперечисленных аберраций стабильные:

а) центрический фрагмент б) изохромосома

II вариант:

1 вопрос: Назовите типы анеуплоидии с данными кариотипами:

а) 46 / 47, +8 б) 2n – 2 2 вопрос: Назовите синдромы с данными кариотипами:

а) 47, +18 б) 46, t (14,21) 3 вопрос: Выберите из нижеперечисленных аберраций стабильные:

а) анафазный мост б) робертсоновская транслокация

Использованные материалы, для подготовки методического пособия:

1. Захаров А.Ф. и др. Хросмосомы человека. М.: Медицина, 1982. 264 с.

2. http://www.studfiles.ru/preview/2362151/page:2/

3. https://worldwide.promega.com/products/next-generation-sequencing/

4. http://megapredmet.ru/1-84538.html

5. https://ru.wikipedia.org/wiki/Методы_секвенирования_нового_поколения



Похожие работы:

«Проектно исследовательская работа Тема работы: Исследование влияния древесной золы и препарата «Эпин – Экстра» на урожайность моркови Выполнил: Лосинков Алексей Сергеевич учащийся 7 класса МБОУ Большекрупецкая СОШ Руководит...»

«ПРОФЕССИОНАЛЬНАЯ КОСМЕЦЕВТИКА В конце 80-годов французский биохимик, известный ученый в косметологии доктор Александр Дингас основал на юге Франции (всемирном исследовательском центре) косметическую лабораторию SOSKIN. Воодушевленный передовыми открытиями в клеточ...»

«ХИМИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. 2004. №3. С. 43–52. УДК 582.998 + 581.19 ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЛИСТЬЕВ КАКАЛИИ КОПЬЕВИДНОЙ (CACALIA HASTATA L.) Д.Н. Оленников*, О.Г. Потанина, Л.М. Танхаева, Г.Г. Николаева Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, Улан-Удэ (Россия), e-mail: ioeb@bsc.buryatia.ru Проведен фармакогностический ан...»

«Гомонов Н.Д. Генезис и особенности криминальной агрессии женщин Генезис и особенности криминальной агрессии женщин Н.Д. Гомонов Юридический факультет МГТУ, кафедра уголовного и административного права Аннотация. В статье на основе комплексного многомерного подхода рассматривается проблема происхождения криминальной агрессии женщин с учетом как соци...»

«НАМЗАЛОВА БАИРМА ДАМДИН-ЦЫРЕНОВНА ПАПОРОТНИКИ БУРЯТИИ 03.02.01 – Ботаника Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Барнаул – 2011 Работа выполнена на кафедре ботаники ГОУ ВПО «Алтайский государственный университет», г. Барнаул Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Шмаков Александр Иванович Оф...»

«ЭКОЛОГИЯ ПРИРОДНОЙ СРЕДЫ РАЦИОНАЛЬНОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ВОДНЫХ РЕСУРСОВ В УСЛОВИЯХ ГЛОБАЛЬНОГО ИЗМЕНЕНИЯ КЛИМАТА Зволинский В.П., академик РАН ФГБНУ «Прикаспийский научно-исследовательский институт аридного земледелия», с Соленое Займ...»

«Образовательное учреждение высшего образования Тверской институт экологии и права Кафедра общей психологии и психологии труда РАБОЧАЯ ПРОГРАММА УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ (МОДУЛЯ) Социальная психология Направление подготовки 022000.62...»








 
2017 www.pdf.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - разные матриалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.