WWW.PDF.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Разные материалы
 

«ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ И ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ МИКРОФЛОРЫ ТОЛСТОЙ КИШКИ В НОРМЕ И ПРИ ОСТРОМ АЛКОГОЛЬНОМ ПСИХОЗЕ ...»

На правах рукописи

ЛЕЙХТЕР Светлана Николаевна

ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ

ПИЩЕВАРИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ И ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ

МИКРОФЛОРЫ ТОЛСТОЙ КИШКИ В НОРМЕ

И ПРИ ОСТРОМ АЛКОГОЛЬНОМ ПСИХОЗЕ

03.03.01 – физиология

14.01.27 – наркология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Архангельск - 2010

Работа выполнена на кафедре биохимии ГОУ ВПО «Северный государственный медицинский университет» федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор Соловьев Андрей Горгоньевич;

доктор биологических наук, доцент Кирпич Ирина Андреевна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Совершаева Светлана Леонидовна;

доктор медицинских наук, профессор Снедков Евгений Владимирович

Ведущая организация: Петрозаводский государственный университет

Защита диссертации состоится «26» ноября 2010 г. в 14 часов на заседании диссертационного совета Д 212.191.01 при Поморском государственном университете имени М.В. Ломоносова по адресу: 163045, г. Архангельск, пр. Бадигина, д. 3.



С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Поморского государственного университета им. М.В. Ломоносова.

Автореферат разослан « »________________2010 г.

Ученый секретарь совета по защите докторских и кандидатских диссертаций, Старцева кандидат биологических наук, доцент Лариса Федоровна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Макроорганизм и населяющая его микрофлора составляют четко интегрированную структуру, обеспечивающую слаженную работу всех органов и систем и базирующуюся на принципе саморегуляции (Онищенко Г.Г., Алешкин В.А., 2002). В физиологических условиях между хозяином и его микрофлорой имеется метаболическое и регуляторное равновесие, в рамках которого последняя играет важнейшую роль в поддержании гомеостаза организма хозяина за счет наличия множественных молекулярных связей в системе хозяин-микрофлора на клеточном, тканевом и генетическом уровнях (Шендеров Б.А., 2005).

Алкогольная интоксикация сопровождается значительными нарушениями гомеостаза, проявляется изменениями белкового, углеводного, липидного, минерального обменов, немаловажную роль в этом принимают дисбиотические сдвиги нормальной микрофлоры кишечника (Кирпич И.А., 2001; Успенский Ю.П., 2008).

Дисбиотические нарушения у больных синдромом зависимости от алкоголя (СЗА), особенно в состоянии острого алкогольного психоза (ОАП), способствуют отягощению патологического процесса за счет нарушения биологических свойств микробных сообществ кишечника. Это приводит к изменению функционирования резидентной микрофлоры и прогрессированию метаболических нарушений.

В последние годы отмечен положительный эффект применения пробиотиков, содержащих основные представители резидентной микрофлоры (бифидум- и лактобактерии), на детоксикацию организма, что улучшает активность кишечных микроорганизмов (Барановский А.Ю., Кондрашина Э.А., 2007), оказывает благоприятное воздействие на физиологические функции организма хозяина путем оптимизации его микроэкологического статуса (Онищенко Г.Г., 2002). Однако проблема метаболических изменений микрофлоры у больных СЗА практически не изучалась.





Таким образом, сравнительное изучение взаимосвязи микрофлоры и ферментативной активности у здоровых лиц и характера ее нарушения при СЗА в период развития и купирования ОАП представляет интерес для разработки алгоритмов диагностики и прогнозирования соматического состояния наркологического контингента, что и определило выбор темы данного исследования.

Цель и задачи исследования. Цель работы – установить взаимосвязь активности ферментов и представителей микробиоценоза толстой кишки у здоровых лиц и при остром алкогольном психозе на фоне физиологической коррекции пробиотиками.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Установить взаимосвязь ферментативного уровня сыворотки крови и копрофильтрата и представителей микробиоценоза толстой кишки у здоровых лиц.

2. Изучить характер нарушений взаимосвязей ферментативной активности сыворотки крови и представителей микробиоценоза толстой кишки у больных синдромом зависимости от алкоголя в состоянии острого алкогольного психоза.

3. Выявить особенности взаимодействия ферментативного и микробного гомеостаза с учетом терапии при остром алкогольном психозе.

4. Выявить механизмы восстановления детоксикационной функции при использовании пробиотиков у наркологических больных.

Положения, выносимые на защиту

1. Состояние эубиоза и ферментативный спектр в физиологических условиях обеспечивают и поддерживают гомеостаз организма, являясь относительно самостоятельно функционирующими стабильными системами.

2. На фоне психотического состояния алкогольного генеза происходит увеличение численности кишечной палочки с изменением ее функциональной активности, что проявляется возникновением множественных корреляционных связей между показателями ферментативного спектра и представителями микрофлоры толстой кишки.

3. Физиологическая биокоррекция пробиотиками «Альгибиф» и «Альгилак» позволяет восстановить детоксикационную функцию у больных синдромом зависимости от алкоголя при остром психотическом состоянии.

Научная новизна исследования Новым в настоящем исследовании является выявление взаимосвязи метаболических показателей и представителей микробиоценоза толстой кишки. Впервые показано внутрисистемное сопряжение ферментных систем сыворотки крови и копрофильтрата и микробного гомеостаза у здоровых лиц.

Выявлено, что, вовлекаясь в реакцию организма на алкогольную интоксикацию, система микробного гомеостаза использует базовые физиологические механизмы. Это указывает на ее доминирующую роль в поддержании гомеостаза организма в физиологических условиях и больных СЗА на фоне синдрома отмены алкоголя.

Впервые сформулирован комплексный механизм поддержания устойчивого гомеостаза пищеварительной системы при участии ключевых микроорганизмов толстой кишки у здоровых лиц и наркологического контингента. Обоснована физиологическая коррекция водорослевыми препаратами метаболических нарушений у больных СЗА в состоянии ОАП на основе детоксикационной роли бифидобактерий и лактобактерий.

Научно-практическая значимость исследования Результаты исследования дополняют представление о роли микрофлоры и ферментов сыворотки крови и копрофильтрата в поддержании гомеостаза организма в норме и в развитии дисфункции изучаемых параметров при синдроме отмены алкоголя и вносят вклад в понимание развития метаболических нарушений организма при наркологическом заболевании.

Полученные данные обосновывают необходимость проведения биокоррекции метаболических нарушений у больных СЗА в психотическом состоянии для повышения детоксикационной функции организма.

На основании полученных результатов внесено рационализаторское предложение «Способ пробиотической коррекции постинтоксикционного синдрома при остром алкогольном психозе» (уд. № 7/10 от 20.09.10).

Результаты исследования используются в лечебно-диагностической деятельности наркологического центра Архангельской областной клинической психиатрической больницы (АОКПБ, акт внедрения от 26.02.2010), внедрены в учебный процесс на кафедре психиатрии, наркологии и клинической психологии Северного государственного медицинского университета (СГМУ) (акт внедрения от 15.04.10).

Апробация работы. Результаты исследования докладывались и обсуждались на XXXIII Ломоносовских чтениях «Медико-экологические проблемы Российского Севера» (Архангельск, 2004), Всероссийской научнопрактической конференции «Здоровье северян – итоги и перспективы в свете реализации национальных проектов» (Архангельск, 2007), межгородской конференции «Актуальные проблемы патофизиологии» (С-Петербург, 2007), Х межрегиональной научно-практической конференции «Молодежь и медицинская наука в XXI веке» (Киров, 2007), I Российском конгрессе «Человек и алкоголь» (С-Петербург, 2007), III съезде фармакологов России «Фармакология – практическому здравоохранению» (С-Петербург, 2007), итоговой научной сессии СГМУ и СНЦ СЗО РАМН «Повышение качества жизни семьи и развитие здравоохранения Европейского Севера»

(Архангельск, 2008), III Российском конгрессе «Человек и алкоголь (алкогольные болезни)» (С-Петербург, 2009).

Исследование проведено в рамках региональной научно-технической программы «Здоровье населения Европейского Севера» и имеет номер государственной регистрации 01200408382.

По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, в том числе 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикации материалов диссертационных исследований.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 127 страницах машинописного текста и состоит из введения, 3 глав, обсуждения, выводов, практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 17 таблицами, 25 рисунками и 2 схемами. Библиографический указатель содержит 200 наименований, из которых 128 работ отечественных авторов и 72 иностранных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Проведено обследование 92 мужчин в возрасте от 25 до 55 лет – жителей г. Архангельска и Архангельской области, европеоидной расы, в том числе:

• 26 практически здоровых мужчин (ср. возраст 41,9±1,5 года) административного состава ЗАО «Аэрофлот-Норд», проходящих ежегодный профилактический осмотр в медсанчасти ЗАО «Аэрофлот-Норд», относящихся к I–II группе здоровья, у которых отсутствовали заболевания желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) и анамнестически и клинически были исключены СЗА и употребление спиртных напитков в течение последних двух недель;

• 66 мужчин (ср. возраст 42,8±0,9 года) с СЗА в состоянии ОАП – галлюциноза (острого алкогольного психотического расстройства преимущественно галлюцинаторного – F10.52 по МКБ-10; синдром зависимости от алкоголя, II стадия, фаза обострения – F10.242). Диагноз ОАП устанавливался на основе клинического обследования и обосновывался наличием у больных СЗА и нахождением в остром психотическом состоянии с психомоторным возбуждением, обильными вербальными галлюцинациями при сохранении общей ориентированности больных. Все пациенты находились на стационарном лечении в наркологическом отделении областной психиатрической больницы в условиях стандартного режима дня и рациона питания (стол №15). Толерантность к алкоголю у больных составляла 1 л. водки и более, стаж алкоголизации – более 8 лет. Срок со дня прекращения многодневного приема алкоголя до момента госпитализации составил 2–3 сут. Обследование больных осуществлялось в момент поступления в наркологический стационар на высоте ОАП и на 6–7 сут. (ко времени завершения проведения курса интенсивной терапии) (Аболонин А.Ф., 1997; Кирпич И.А., 2001 и др.).

Больные ОАП были распределены на две группы в зависимости от метода коррекции: I – 34 человека (ср. возраст 43,5±0,9 года), получавшие только традиционную дезинтоксикационную терапию; II – 32 человека (ср.

возраст 42,3±1,1 года), которым, помимо курса интенсивной терапии, проводилась биокоррекция водорослевыми препаратами, обогащенными бифидобактериями и лактобактериями, с содержанием пробиотической культуры в 1 таблетке не менее 106 КОЕ/г B.bifidum («Альгибиф») и 108 КОЕ/г L.acidophilus («Альгилак») по стандартной схеме 3 раза в день (курс 5 дней) (в соответствии с отраслевым стандартом 91500.11.0004 – 2003 «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника». Приказ МЗ РФ №231 от 9.06.2003).

Исследование ферментативной активности сыворотки крови – гаммаглутамилтрансферазы (ГГТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), амилазы – проводили стандартными методами на биохимическом анализаторе «CobasMira» (Австрия) наборами «Cormay» (Польша); исследование ферментативной активности копрофильтрата (амилазы, ЩФ) – унифицированными методами на фотоэлектроколориметре наборами фирмы «Vital» (Россия). Исследование количественного и качественного микробного пейзажа толстой кишки осуществляли по методике Московского НИИ эпидемиологии и микробиологии и в соответствии с отраслевым стандартом.

Всего проведено биохимических исследований – 500, микробиологических – 1422.

Статистическая обработка результатов исследования проводилась с использованием пакета программ «Statistica 6.0». Вычислялась одномерная описательная статистика для каждого показателя, производилась оценка распределения признаков на нормальность. Для проверки статистической гипотезы разности средних значений использовался непараметрический критерий Манна-Уитни, частот встречаемости отклонений в группах – критерий Фишера. Для изучения связей между переменными применялись корреляционный анализ и факторный анализ по методу нормализованного варимакса (Боковиков В.П., Ивченко Г.И., 2006).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Анализ численности микроорганизмов толстой кишки у здоровых мужчин выявил дефицит лактобактерий в 61,9 % случаев, энтерококков – в 50,0 % и незначительное снижение численности бифидобактерий в 19,2 % и кишечной палочки – 16,0 % случаев, при этом частота обнаружения повышенной численности кишечной палочки отмечалась очень редко (4,0 %), лактозонегативные формы регистрировались в 16,7 % и лишь в 4,2 % случаев

– гемолитические ее формы; уровень патогенных стафилококков составил не более 4,2 %; условно-патогенных и патогенных энтеробактерий не было обнаружено (рис. 1). Нестабильными облигатными представителями у здоровых лиц явились лактобактерии и энтерококки; бифидобактерии и кишечная палочка могут быть отнесены к стабильной микрофлоре;

функциональная активность нормальной микрофлоры и позволяет поддерживать гомеостаз организма.

При анализе микробиоценоза толстой кишки на высоте ОАП регистрировался резкий дефицит лактофлоры в 83,9 %, энтерококков – в 71,4 % случаев и значительное – в 2,7 раза – снижение бифидобактерий (до 51,7 %, р0,001 по сравнению с группой здоровых лиц). Отмечалась диспропорция в содержании кишечной палочки: примерно в равных соотношениях был выявлен дефицит и высокодостоверное увеличение численности данного вида микроорганизмов (18,9 % и 18,5 %, соответственно) и резкое – в 5 раз – возрастание числа кишечной палочки с патогенными (гемолитическими) свойствами (р0,05 по отношению к здоровым), а также увеличение частоты функционально неактивной Е.сoli и появление золотистого стафилококка в 2 раза чаще (8,2 %).

Таким образом, на фоне стрессового постинтоксикационного состояния происходят изменения в сторону компенсации количества кишечной палочки и ее функциональной активности. Разнонаправленные изменения содержания кишечной палочки показывают, что существуют различные стратегии реагирования организма на алкогольный стресс.

На фоне проводимой традиционной детоксикационной терапии отмечено сохранение дефицита облигатных представителей (рис. 1). Так, частота дефицита лактобактерий составила 79,4 %, энтерококков – 63,7 %, бифидобактерий – 45,4 % (р0,01 по отношению к здоровым лицам), при возрастающем увеличении численности кишечной палочки с сохраняющимися функциональными диспропорциями. Следовательно, традиционное детоксикационное лечение ОАП не способствует восстановлению микроэкологического равновесия кишечника, что позволяет утверждать о продолжающейся дисфункции кишечника.

% хх х ^^^ х^

-20 ^

-40 ххх

-60

-80 бифидо лакто энтеро Е.coli Увел. гемол. л-за (-) S.aureus E.coli Е.coli E.coli здоровые I гр. II гр.

Рис. 1. Частота встречаемости дисбаланса микрофлоры толстой кишки на фоне лечения ОАП, % Примечание: отличия достоверны: по отношению к группе здоровых при - р0,05, хх - р0,01, ххх - р0,001; между I и II гр. при ^ - р0,05, ^^^ х р0,001.

Использование в дополнение к традиционной терапии водорослевых пробиотических препаратов «Альгибиф» и «Альгилак» (рис. 1) показало, что на фоне физиологической биокоррекции происходит снижение дефицита бифидофлоры (25,0 %, р0,05 по сравнению с I гр.) и энтерококков (48,6 %) и достоверное снижение дефицита кишечной палочки в 6 раз (3,2 %, р0,05).

Частота повышения численности кишечной палочки была выше, чем у здоровых лиц, и составила 12,3 %, а выделение гемолитических форм и функционально незначимых эшерихий практически соответствовало группе здоровых мужчин.

Таким образом, биокоррекция приводит к быстрой нормализации микробиоценоза толстой кишки и восстановлению функционирования облигатных представителей нормофлоры, за счет активизации собственных защитных механизмов организма.

Изучение ферментативной сахаролитической активности Е. соli показало, что функциональная активность Е. соli, выделенной у здоровых мужчин, соответствует физиологическим показателям. На высоте ОАП отмечалось снижение активности мальтазы до 73,3 % (р0,001), лактазы – до 68,2 % и усиление рамназы – до 81,8 % (р0,001 по отношению к группе здоровых лиц). При отсутствии коррекции пробиотическими препаратами наблюдалось дальнейшее снижение активности лактазы до 58,6 % (р0,001), активность других гидролаз оставалась на том же уровне. На фоне проводимой биокоррекции отмечено восстановление активности изучаемых гидролаз: лактазы – до 86,4 % (р0,001), мальтазы – до 81,8 % и рамназы – до 95,5 % (р0,001 по сравнению с I гр.).

На фоне проводимой физиологической биокоррекции имело место восстановление активности гидролаз у штаммов Е.соli, что существенно повышает качество проводимого лечения, однако полного восстановления активности к 7 сут. не наблюдалось.

Анализ дисбаланса ферментативного состава сыворотки крови и копрофильтрата (ЩФ и амилаза) показал, что активности указанных ферментов выше нормы в крови у здоровых людей не регистрировалось. На высоте ОАП отмечалось увеличение активности ЩФ в 15,0 % и амилазы в 28,3 % случаев.

После проведенного традиционного лечения частота встречаемости повышенной активности ЩФ снизилась до 6,9 %, в то время как на фоне биокоррекции повышение активности указанного фермента выявлялось в 21,9 % случаев (р0,05, по сравнению с I гр.). Подобные изменения наблюдались и при исследовании ЩФ копрофильтрата. Так, на фоне традиционного лечения увеличение активности фермента в копрофильтрате, по сравнению со здоровыми, регистрировалось в 4,0 %, а на фоне коррекции – в 15,8 % случаев (р0,05, по отношению к I гр.). Обратная закономерность отмечалась при изучении активности амилазы в сыворотке крови и копрофильтрате. У лиц, находящихся на традиционном лечении, частота увеличения активности амилазы крови в конце детоксикационного периода обнаружена в 41,4 %, при биокоррекции – лишь в 9,4 % случаев (р0,001, по сравнению с I гр).

Достоверной разницы активности данных ферментов копрофильтрата в обеих группах не регистрировалось. Следовательно, ОАП сопровождается дисбалансом изучаемых ферментов и основных представителей микробиоценоза.

Корреляционный анализ параметров ферментативной активности и микробиологических показателей выявил отсутствие межсистемных связей в группе сравнения, следовательно, у здоровых лиц наблюдается относительно независимое функционирование ферментных систем сыворотки крови и копрофильтрата и микробного гомеостаза (рис. 2а), что физиологически целесообразно с позиций энергетического обеспечения.

–  –  –

Однако были выявлены корреляционные внутрисистемные связи в каждой изучаемой группе показателей. Нами отмечены прямые корреляционные зависимости между численностью лактобактерий и энтерококков и числом кишечной палочки и энтерококков (r=0,67 и r=0,64, соответственно, при р0,05).

Обнаруженные взаимосвязи иллюстрируют физиологически адекватное функционирование системы микробного гомеостаза: рост или уменьшение представителей облигатной микрофлоры прямо пропорциональны аналогичным изменениям одного из представителей изучаемой нормофлоры. Корреляционных связей с бифидобактериями не было обнаружено, что свидетельствует об обособленности и стабильности бифидофлоры. Прямая достоверная связь между активностью ГГТ и амилазы копрофильтрата указывает на сопряженное функционирование системы детоксикации. В целом, проведенный корреляционный анализ у здоровых лиц показал адекватную степень внутрисистемного сопряжения ферментных систем сыворотки крови и копрофильтрата и микробного гомеостаза.

Корреляционный анализ на высоте ОАП (рис. 2б) продемонстрировал, что организм использует базовую физиологическую стратегию в системе микробного гомеостаза для этанольной детоксикации. Однако, учитывая воздействие такого мощного стрессора, как алкоголь, наблюдается прямая слабая связь между бифидо- и лактобактериями, что указывает на некоторое напряжение в системе облигатной микрофлоры.

Иная картина отмечается в структуре связей ферментных систем сыворотки крови и копрофильтрата:

активность ГГТ, как индикатора алкогольной интоксикации, обнаруживает прямую достоверную связь с уровнем ЩФ. Данный факт указывает на энергетическую «цену» процесса алкогольной дезинтоксикации. Изменение углеводного метаболизма на высоте ОАП приводит к сопряжению работы ферментных систем сыворотки крови и микробного гомеостаза: появляется слабая обратная зависимость между активностью амилазы крови и количеством энтерококков. Таким образом, в реакцию организма на алкогольную интоксикацию вовлекаются обе изучаемые системы, однако, различным путем:

система микробного гомеостаза использует базовые физиологические механизмы, лишь расширяя их, что указывает на ее относительную стабильность. Ферментные системы крови, по данным корреляционного анализа, более лабильны.

Проводимое традиционное лечение ОАП коренным образом меняет структуру и значимость корреляционных связей между ферментативной и микроэкологической системами (рис. 2в). Внутри системы микробного гомеостаза отмечается напряжение и изменение базового защитного физиологического механизма (наблюдались прямые достоверные связи между бифидо-, лактобактериями и энтерококками и полностью исчезали связи числа кишечной палочки с энтерококками).

В то же время наблюдается резкое сопряжение между ферментативной и микроэкологической системами:

повышенная алкогольдегидрогеназная активность кишечной палочки требует энергетического обеспечения, что напрямую подтверждается наличием достоверной прямой связи между численностью кишечной палочки и активностью ЩФ копрофильтрата (r=0,76, р0,05). Повышенный уровень индуцируемой алкоголем ГГТ и энергообеспечивающий уровень ЩФ сыворотки крови приводят к росту энтерококков. Измененный метаболизм углеводов сопровождается однонаправленным увеличением содержания амилазы сыворотки крови и копрофильтрата. В целом, анализ корреляционных связей в группе лиц с ОАП показал, что традиционная детоксикационная терапия глубоко меняет структуру функционирования ферментативного и микробного гомеостаза, значительно повышая ее энергетическую «цену».

Анализ корреляционных зависимостей между изучаемыми системами на фоне биокоррекции препаратами «Альгибиф» и «Альгилак» выявил, что реакция организма в данном случае физиологически целесообразна. Начинающееся восстановление взаимодействия между численностью кишечной палочки и энтерококков говорит о меньшем стрессорном воздействии и восстановлении ферментативной активности кишечной палочки, что позволяет нормализовать уровни данных микроорганизмов (рис. 2г). Однако непродолжительная биокоррекция не позволяет полностью восстановить связи между числом лактобактерий и энтерококков. Отсутствие корреляционной связи между количеством лактобактерий и бифидобактерий подтверждает значимость биокоррекции и способствует более быстрому восстановлению функции кишечника. Появлялась прямая связь между активностью ЩФ сыворотки крови и амилазы копрофильтрата (r=0,51, р0,05), подобной связи не отмечалось во всех предыдущих корреляционных взаимодействиях внутри данной системы.

Этот факт указывает на энергетическое обеспечение ферментными системами плазмы измененного метаболизма углеводов. Закономерное повышение уровня ЩФ крови приводит к снижению численности энтерококков, в отличие от группы с традиционной терапией. Происходит логически оправданное с точки зрения алкогольдегидрогеназной активности сопряжение функций ГГТ и уровня кишечной палочки. Следовательно, проводимая биокоррекция способствует восстановлению функционирования изучаемых систем гомеостаза.

Учитывая сложный, зачастую нелинейный характер функционирования живых систем, мы сочли необходимым также использовать для уточнения механизмов детоксикации метод многомерного факторного анализа (рис. 3).

В группе здоровых лиц (рис.

3а) – с ненапряженным функционированием систем ферментного и микробного гомеостаза – наблюдалась следующая картина:

1 фактор – нормальная изменчивая микрофлора – подтверждал устоявшееся положение о роли микроэкологии в адаптации организма. 2 фактор – энергетического обеспечения – имел характерную внутреннюю структуру:

значение факторной нагрузки ЩФ крови было отрицательным, ЩФ копрофильтрата – положительным, что указывает на реципрокные отношения в системе энергообеспечения. 3 фактор – детоксикации – в сочетании с активностью амилазы копрофильтрата иллюстрировал баланс ферментных систем. 4 фактор отражал защитные функции, включая стабильную микрофлору (бифидобактерии) наряду с активностью амилазы плазмы крови. Подводя итог анализу факторной структуры в группе здоровых лиц, можно утверждать, что ненапряженный ферментно-микробный гомеостаз поддерживался микроэкологической составляющей с адекватным механизмом энергообеспечения на фоне стабильно представленной системы защиты и детоксикации.

Ф2 М1 0,93 0,84 М2 М4 0,91 0,83 0,83 Ф4 0,8 М1 Ф1 М3 0,94 0,73 0,86 Ф5 Ф2 0,94 0,93 0,77 0,88 М3 Ф1 Ф3

–  –  –

Рис. 3. Факторный анализ ферментативного спектра и микробиологических показателей: а – у здоровых лиц; б – ОАП (1 сут.), в – I гр., г – II гр.

Условные обозначения:

М1 – Е. сoli; М2 – бифидобактерии; М3 – лактобактерии; М4 – энтерококки;

Ф1 – ГГТ; Ф2 – ЩФ; Ф3 – ЩФ копрофильтрата; Ф4 – амилаза; Ф5 – амилаза копрофильтрата.

В группе наркологических больных на высоте ОАП (рис. 3б) факторный анализ демонстрировал четкую направленность организма на борьбу с постинтоксикационным состоянием: на первый план выступила плазменная система детоксикации (1 фактор), поддержанная энергетическим обеспечением (ГГТ и печеночная изоформа ЩФ). На второе – (2 фактор) – вышел механизм коррекции измененного углеводного метаболизма (лактобактерии), и 3 фактор представлен алкогольдегидрогеназной активностью кишечной палочки. Таким образом, в ситуации этанольного стресса происходит активация классических систем детоксикации (печень) наряду с вовлечением лабильных структур микробного гомеостаза.

В группе больных, получавших традиционную терапию (рис. 3в), в структуру 1 фактора вошли энергетическое обеспечение микробными ферментами и измененный функциональный профиль E.coli, 2 фактор составили маркеры детоксикации: ГГТ и бифидобактерии, 3 фактор включал механизм коррекции измененного углеводного метаболизма (лактобактерии) и энергетическое обеспечение (ЩФ крови). Анализ факторной структуры показывает, что традиционная терапия активизирует коррекцию метаболических изменений при синдроме отмены алкоголя.

На фоне лечения пробиотиками наблюдались принципиально иное распределение факторных нагрузок и, соответственно, значимость факторов (рис. 3г). На первый план (1 фактор) выступила система детоксикации стабильной микрофлоры с энергетическим обеспечением ферментами печени (ЩФ крови), в структуру 2 фактора вошли алкогольдегидрогеназная активность кишечной палочки и маркер интоксикации – ГГТ, только на третьем месте (3 фактор) энергообеспечение микробными ферментами, и 4 фактор демонстрировал коррекцию измененного углеводного метаболизма. Анализируя вышесказанное, следует отметить, что коррекция пробиотиками, если не полностью, то хотя бы частично, направляет дезинтоксикационные процессы по физиологическому пути, что, соответственно, снижает «цену» коррекции для организма.

Таким образом, проведенный факторный анализ показал дифференцированные механизмы реагирования организма на этанольный стресс, а изучение взаимозависимости ключевых представителей микрофлоры и ферментативного спектра у здоровых лиц и больных ОАП обосновывает необходимость физиологической биокоррекции острых постинтоксикационных состояний для восстановления метаболических нарушений у наркологических больных.

На основании полученных результатов нами разработаны комплексные механизмы поддержания устойчивого гомеостаза ЖКТ у здоровых лиц и восстановления утраченных механизмов на фоне синдрома отмены алкоголя при проведении физиологической биокоррекции пробиотиками.

Проведенные исследования позволили внести дополнения в функционирование пищеварительной системы с учетом нормальной микрофлоры. Начиная с конца прошлого века, большинство исследователей склонялись к существованию так называемого «микробного органа», представленного ключевыми микроорганизмами (Macfarlane G.T., 1997;

Бухарин О.В., 2006). Так, в желудке в небольшом количестве присутствуют лактобактерии и кишечные палочки, попадающие с пищей. Основная функция микроорганизмов проявляется в тонком кишечнике, где мукозная микрофлора, включая бифидобактерии, лактобактерии и кишечную палочку, обеспечивает дополнительную метаболическую функцию, направленную на улучшение полостного и пристеночного пищеварения, за счет выделения олигосахаридаз и дисахаридаз. Кроме того, нормальная микрофлора обеспечивает выраженную детоксикационную функцию, проявляющуюся абсорбцией, трансформацией и биодеградацией различных ксенобиотиков, попадающих в ЖКТ, что улучшает детоксикационную функцию печени. В толстом кишечнике указанные микроорганизмы обеспечивают инактивацию кишечных ферментов и за счет гидролиза питательных веществ предотвращают эндотоксемию. Следовательно, нормальная микрофлора вносит свой вклад в поддержание устойчивого гомеостаза.

При наличии дисбиотических нарушений на фоне синдрома отмены алкоголя происходит снижение количества лактобактерий и повышение численности кишечной палочки за счет изменения рН среды, что приводит к снижению ее ферментативной активности, что и было показано нами в настоящем исследовании. Происходит снижение содержания основных ключевых микроорганизмов тонкого и толстого кишечника (бифидо- и лактобактерии) и компенсаторное повышение численности кишечной палочки с изменением ее метаболизма. Это провоцирует снижение метаболической активности и нарушение полостного и пристеночного пищеварения, снижение детоксикации различных поллютантов и нарушение инактивации кишечных ферментов толстого кишечника, что приводит к выраженной эндотоксемии и способствует повышению нагрузки на печень.

Проводимая физиологическая биокоррекция позволяет достоверно быстро привести к нормализации ключевой микрофлоры в ЖКТ, восстановлению ее метаболической и детоксикационной функций и значительному снижению эндотоксемии, что было доказано снижением активности ГГТ. Подобным образом осуществляется возможное физиологическое восстановление гомеостаза ЖКТ при ОАП.

Таким образом, проведенное нами исследование по изучению взаимосвязи ключевых представителей микрофлоры и ферментативного спектра у здоровых лиц и больных ОАП обосновывает необходимость применения физиологической биокоррекции для восстановления метаболических нарушений у больных ОАП (уд. на рац. предл. № 7/10 от 20.09.10).

ВЫВОДЫ

1. На фоне физиологической активности ферментов сыворотки крови (гамма-глутамилтрансферазы, щелочной фосфатазы и амилазы) и копрофильтрата (щелочной фосфатазы и амилазы) ферментно-микробный гомеостаз поддерживается микроэкологической составляющей при незначительном дефиците E.coli (16,0 %), бифидобактерий (19,2 %), энтерококков (50,0 %) и лактобактерий (61,9 %); доля условно-патогенной и функционально неактивной микрофлоры незначительна (16,6 %).

2. На высоте алкогольобусловленного психотического состояния происходит активация классических систем детоксикации с вовлечением лабильных структур микробного гомеостаза, что подтверждает характер нарушений взаимосвязей активности ферментов сыворотки крови и представителей облигатной микрофлоры толстой кишки, проявляющийся резким увеличением активности гамма-глутамилтрансферазы (в 3 раза), усугублением дефицита ключевой микрофлоры (лактобактерий – в 83,9 %, энтерококков – 71,4 %, бифидобактерий – 51,7 % случаев) и дисфункцией кишечной палочки.

3. Традиционная детоксикационная терапия глубоко меняет структуру функционирования ферментативного и микробного гомеостаза за счет усугубления метаболических нарушений, что напрямую подтверждается связью между численностью кишечной палочки и активностью щелочной фосфатазы копрофильтрата на фоне сохраняющегося высокого уровня гаммаглутамилтрансферазы и дисбиотических нарушений микрофлоры.

4. Физиологическая биокоррекция комплексными пробиотиками при остром алкогольном психозе восстанавливает собственные защитные механизмы организма, что приводит к быстрому восстановлению соотношения ключевых микроорганизмов толстой кишки, функциональной активности кишечной палочки и нормализации активности ферментов копрофильтрата (щелочной фосфатазы и амилазы) и сыворотки крови (гамма-глутамилтрансферазы, щелочной фосфатазы и амилазы).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для повышения эффективности диагностики алкогольобусловленных микроэкологических нарушений толстой кишки рекомендуется использовать в качестве маркеров параллельное исследование активности ферментов (щелочной фосфатазы и амилазы) сыворотки крови и копрофильтрата.

2. Для восстановления метаболического функционирования и обеспечения детоксикации при купировании алкогольного психотического состояния рекомендуется использование пробиотических препаратов «Альгибиф» (106 КОЕ/г B.bifidum) и «Альгилак» (108 КОЕ/г L.plantarum) на протяжении не менее 5 сут.

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ

ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Лейхтер С.Н. Влияние дисбиотических нарушений на характер метаболических сдвигов при острой алкогольной интоксикации / С.Н.

Лейхтер, Н.А. Шидакова, О.В. Лебедева // Бюллетень СГМУ. – 2004. – №1.– С. 135 – 136.

2. Лейхтер С.Н. Взаимосвязь ферментативной активности с характером микрофлоры толстого кишечника при острых алкогольных психозах / С.Н.

Лейхтер, Н.А. Шидакова // Бюллетень СГМУ. – 2005. – №1. – С. 141 – 142.

3. Лейхтер С.Н. Нарушение микробиоценоза толстого кишечника при острых алкогольных психозах и его коррекция водорослевыми пробиотическими препаратами / С.Н. Лейхтер, О.В. Лебедева // Бюллетень СГМУ. – 2005. – №2.

– С. 142 – 144.

4. Лейхтер С.Н. Коррекция дисбиотических нарушений при острых алкогольных психозах водорослевыми пробиотическими препаратами / С.Н.

Лейхтер, О.В. Лебедева, Н.В. Соловьева, В.А. Соловьева // Бюллетень СГМУ.

– 2006. – №1. – С. 101 – 103.

5. Соловьева Н.В. Биохимические и микробиологические особенности больных с синдромом зависимости от алкоголя на фоне пробиотической коррекции / Н.В. Соловьева, Е.А. Бульина, С.Н. Лейхтер, О.В. Лебедева и др.

// Матер. I Российского конгресса «Человек и алкоголь». – СПб, 2007. – С.113 – 114.

6. Лейхтер С.Н. Биохимические и микробиологические проявления алкогольной интоксикации и их коррекция / С.Н. Лейхтер, Н.А. Шидакова, В.А. Соловьева // Матер. Х межрегион. конференции молодых ученых с междунар. участием. – Киров, 2007. – №1. – С. 72 – 73.

7. Соловьева Н.В. Применение пробиотических препаратов для коррекции микробиологических и биохимических нарушений при алкогольной интоксикации / Н.В. Соловьева, С.Н. Лейхтер, Н.А. Шидакова, Т.А. Бажукова и др. // Психофармакология и биологическая наркология. – 2007. – Т. 7. – Ч. 2. / (Матер. III съезда фармакологов России) – С. 1958–1959.

8. Соловьева Н.В. Изменения микробиоценоза толстого кишечника у больных в состоянии острого алкогольного психоза и их коррекция / Н.В.

Соловьева, С.Н. Лейхтер, О.В. Лебедева, Т.А. Бажукова // Экология человека.

- 2006. – Приложение 4/1. – С. 142 – 144.

9. Соловьева Н.В. Изменения ферментативной активности крови и микробиоценоза толстого кишечника у больных с острыми алкогольными психозами и их пробиотическая коррекция / Н.В.

Соловьева, С.Н. Лейхтер, Н.А. Шидакова, О.В. Лебедева и др. // Наркология – 2007. – №12. – С. 57 – 61.

10. Kirpich I.A. Probiotics restore bowel flora and improve liver enzymes in human alcohol-induced liver injury: a pilot study / I. Kirpich, N. Solovieva, S.

Leikhter, N. Shidakova et al. // Alcohol. – 2008. – Vol. 42. – P.675 – 682.

11. Соловьева Н.В. Влияние активности ферментов сыворотки крови на кишечный микробиоценоз при острых алкогольных психозах / Н.В.

Соловьева, С.Н. Лейхтер, О.В. Лебедева, Т.А. Бажукова и др. // Матер. III Российского конгресса «Человек и алкоголь (алкогольные болезни)». – СПб, 2009. – С.81.

12. Соловьева Н.В. Взаимосвязь ферментативной активности сыворотки крови и микроэкологических нарушений толстого отдела кишечника у больных с острыми алкогольными психозами / Н.В.

Соловьева, С.Н. Лейхтер, О.В. Лебедева, Т.А. Бажукова и др. // Экология человека. – 2010. – №4. – С. 37 – 41.

13. Kirpich I. Effect of probiotic therapy on liver enzymes and gut microflora in human subjects with the alcohol withdrawal syndrome / I. Kirpich, N. Solovieva, S. Leikhter, N. Shidakova et al. // Poster session Abstracts. IPA World Congress. – 2010. – P.6.



Похожие работы:

«Ученые записки Крымского федерального университета имени В. И. Вернадского Биология, химия. Том 2 (68). 2016. № 3. С. 11–27. УДК 612.821 ВЗАИМОСВЯЗИ ХАРАКТЕРИСТИК ТЕМПЕРАМЕНТА И ПОКАЗАТЕЛЕЙ ВАРИАЦИИ СЕРДЕЧНОГО РИТМА ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА Куличенко А. М., М...»

«Ученые записки Таврического национального университета им. В.И. Вернадского Серия «Филология. Социальные коммуникации» Том 27 (66). № 1. Ч.2 – С. 57-63 УДК 81’246.2’276.6’373.46/611 Ономасиологическая структу...»

«Экосистемы, их оптимизация и охрана. 2014. Вып. 10. С. 57–67. УДК 633.878.3+712.2 ЖИЗНЕННЫЕ СТРАТЕГИИ И ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ОЗЕЛЕНЕНИИ CHOSENIA ARBUTIFOLIA (SALICACEAE) Москалюк Т. А. Ботанический сад-институт ДВО РАН,...»

«Ученые записки Таврического национального университета им. В. И. Вернадского Серия «Биология, химия». Том 26 (65). 2013. № 2. С. 34-40. УДК 612.65 : 616-056.216 МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ АКТИВНОСТИ ЗЕРКАЛЬНЫХ НЕЙРОНОВ У ДЕТЕ...»

«УДК 911.3 Драган Н.А. Пути оптимизации агроэкологического состояния почвенных ресурсов Крыма Таврический национальный университет имени В.И. Вернадского, г. Симферополь Аннотация. Излагаются результаты исследований агроэкологического состояния почвенных ресурсов Крыма, проявления первичных и вторичных...»

«ХИМИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. 2007. №4. С. 85–90. УДК 543.854.75 + 582.751.42 МЕТОДИКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУММАРНОГО СОДЕРЖАНИЯ ПОЛИСАХАРИДОВ В СЕМЕНАХ ЛЬНА (LINUM USITATISSIMUM L.) * © Д.Н. Оленников, Л.М. Танхаева Институт общей и...»

«ХИМИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. 2006. №3. С. 39–47. УДК 582.998 + 581.19 ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ ГАЛЕНИИ РОГАТОЙ (HALENIA CORNICULATA (L.) CORNAZ) Т.М. Шишмарева, О.Г. Потанина, Л.М. Танхаева, Д.Н. Оленников* © Институт общей и экспериментальной биологии...»

«Ученые записки Таврического национального университета им. В. И. Вернадского Серия «Биология, химия». Том 24 (63). 2011. № 1. С. 97-108. УДК 581.45:695.932(477.60) АНАТОМО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЛИСТА НЕКОТОРЫХ ВИДОВ РОДА CAMPANULA L. ПРИ ИНТРОДУКЦИИ В УСЛОВИЯХ ЮГО-ВОСТОКА УКРАИНЫ Крохмаль И.И. Донецкий ботанический сад НАН...»

«Ученые записки Таврического национального университета им. В. И. Вернадского Серия «Биология, химия». Том 24 (63). 2011. № 1. С. 10-17. УДК 573.6: 537.86 ВЛИЯНИЕ ЭЛЕКТРИЧЕСКИХ ПОЛЕЙ НА РАСТЕНИЯ Богатина Н.И.1, Шейкина Н.В.2 Ф...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ «САРАТОВСКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ Н.Г.ЧЕРНЫШЕВСКОГО» Кафедра ботаники и экологии МАКРОЛИХЕНОФЛОРА ПРИРОДНОГО ПАРКА «КУМЫСНАЯ ПОЛЯНА» АВТОРЕФЕРАТ МАГИСТЕРСКОЙ РАБО...»

«Приказ ФСФР РФ от 25.01.2007 N 07-4/пз-н (ред. от 20.07.2010) Об утверждении Стандартов эмиссии ценных бумаг и регистрации проспектов ценных бумаг (Зарегистрировано в Минюсте РФ 15.03.2007 N 9121) ...»

«КАЗАНСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИНСТИТУТ ЭКОЛОГИИ И ГЕОГРАФИИ В.В. ЗОБОВ ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ТОКСИКОЛОГИЯ Конспект лекций Казань-2013 Метаданные Направление подготовки: 022000.68: Экология и природопользование (профиль: «Экологическая безопасность и управление в сфере охраны окружающей среды») (магистратура...»

«Министерство образования и науки РФ ФГАОУ ВПО «Казанский (Приволжский) федеральный университет» Институт фундаментальной медицины и биологии Кафедра биоэкологии, гигиены и общественного...»








 
2017 www.pdf.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - разные матриалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.